Combinaciones de bases nutritivas empleadas en el desarrollo del medio caldo nitrato / Nutritional bases combinations used in the development of nitrate broth medium

INTRODUCCIÓN: el medio caldo Nitrato es utilizado en los laboratorios de microbiología clínica como prueba bioquímica para la identificación de enterobacterias por la capacidad que tienen estos microorganismos para reducir los nitratos a nitrito. OBJETIVO: evaluar diferentes combinaciones de bases nutritivas destinadas al desarrollo del medio de cultivo. MÉTODOS: se seleccionó como material biológico un conjunto de cepas certificadas y aisladas pertenecientes a especies representativas de varios géneros de la familia de Enterobacteriaeceae. Se diseñaron cinco variantes y se utilizó como bases nutritivas la peptona de gelatina y el extracto de carne, en diferentes combinaciones y concentraciones, para determinar el incremento de absorbancia en el tiempo como indicador de la densidad microbiana y se calculó la velocidad de crecimiento. Se evaluó la capacidad funcional del medio de cultivo por la habilidad de las especies de reducir o no el nitrato a nitrito. RESULTADOS: la mejor combinación de bases nutritivas correspondió a la de mayor concentración de peptona de gelatina (10 g/L) y extracto de carne (3 g/L). La evaluación organoléptica y fisicoquímica del medio de cultivo mostró características satisfactorias para este tipo de producto. Se comprobó la reducción satisfactoria del nitrato a nitrito, por los microorganismos empleados como control positivo. CONCLUSIONES: el medio de cultivo caldo nitrato desarrollado, cumple con los requisitos de calidad y su funcionalidad microbiológica y permite la caracterización de especies bacterianas que poseen la capacidad de reducir los nitratos a nitritos.

INTRODUCTION: the nitrate broth culture medium is used in clinical microbiology laboratories as a biochemical test for the identification of Enterobacteriaceae by the ability of these microorganisms to reduce nitrate to nitrite. OBJECTIVE: to evaluate different combinations of nutritive bases for the development of the culture medium. METHODS: certificed strains were selected as biological test material. The strains belong to different generu of the Enterobactericiae family. Five variants were designed with gelatin peptone and meat extract as nutrient bases at different concentrations and combinations, the growth rate was calculated by measuring the increase in absorbance over time as an indicator of microbial density. The functionality of the culture medium was evaluated by the ability of tested bacteria or reduce nitrate to nitrite RESULTS: the best combination of nutritive bases contained the highest concentration of gelatin peptone (10 g/L) and beef extract (3 g/L). Physicochemical and sensory evaluation of the culture medium showed results characteristic for this type of product. Reductions of nitrate to nitrite were observed for all tested microorganisms choosed as the positive control. CONCLUSIONS: the nitrate broth culture medium developed complies the quality requiment and its microbiological functionality allows the characterization of bacterial species by the ir ability to reduce nitrate to nitrite

Aproximaciones de bioquímica clásica al estudio de la relación entre la estructura y la función de la rodopsina Y / Approaches to the study of classical biochemistry of the relationship between structure and function of the rhodopsin

La proteína fotorreceptora rodopsina (R) fue extraída de los segmentos externos de los bastoncillos de retinas bovinas con el detergente n-dodecil β-D-maltósido (DM) y purificada a homogeneidad mediante cromatografía de afinidad. El entrecruzamiento químico de la R y de la rodopsina fotoactivada (R*) con los agentes bifuncionales sulfo-succinimidilo 4-(N-maleimidometilo) ciclohexano-1-carboxilato (sulfo-SMCC) o m-maleimidobenzoilo-N-hidroxisuccinimido ester, sugirieron la naturaleza oligomérica de la proteína fotorreceptora. La caracterización de los parámetros hidrodinámicos de la R y la R* en presencia de 0.1% DM, mediante cromatografía de exclusión molecular y sedimentación sobre gradientes de sacarosa, permitió estimar los tamaños de los complejos R:DM y R*: DM. Los resultados concuerdan con una estructura cuaternaria dimérica tanto para la R como para la R*. La R entrecruzada con sulfo-SMCC, en presencia de luz, fue estabilizada en un fotointermediario que absorbió a ~ 470 nm. Experimentos de proteólisis con termolísina sobre los dímeros nativos de R y sobre los monómeros de R generados por medio del uso de altas concentraciones de DM, complementados con estudios de modelaje basados en la estructura cristalina reportada de la proteína, sugirieron que el reactivo sulfo-SMCC generó un entrecruzamiento intramolecular entre la Cys140 y la Lys248 de la R, el cual posiblemente es el responsable de la incapacidad de la proteína de sufrir el cambio conformacional requerido para llegar a su estado fotoactivado.

Resistencia a las fluoroquinolonas y otros antimicrobianos en cepas de Salmonella spp. aisladas en el procesamiento de pollo entero / Fluoroquinolone resistance and other drugs in Salmonella spp. strains isolates from whole chicken processing

El objetivo de este estudio fue determinar patrones de resistencia y multirresistencia de cepas de Salmonella spp. Aisladas de una planta procesadora de aves, hacia las quinolonas y fluoroquinolonas (ácido nalidíxico=Na, ciprofloxacina=Cf y enrofloxacina= Ex), así como a otros antimicrobianos: tetraciclinas (T), oxitetraciclina (O), neomicina (N), nitrofurantoina (Nf), trimetoprim (Tr) y cloranfenicol (C). Un total de 146 aislamientos de Salmonella spp. fueron obtenidos de diferentes fuentes: 34 cepas provenientes de mezclas de vísceras blancas (colón, ciegos) y vísceras rojas (hígado y bazo); 87 cepas aisladas de las canales en los procesos de desplume, eviscerado, enfriamiento y empacado; 8 cepas obtenidas de subproductos comestibles (patas, cuellos, hígados y mollejas) y 19 cepas de muestras de ambientes (agua, hielo y superficies de equipos). Se utilizaron técnicas microbiológicas convencionales, pruebas bioquímicas, serológicas y pruebas de susceptibilidad a los antibióticos por difusión en agar. Los resultados revelaron una alta resistencia para Na (73,3 por ciento; 107/146), Nf (60,2 por ciento; 88/146), T (56,2 por ciento; 82/146), O (54,8 por ciento; 80/146), Tr (54,1 por ciento; 79/146) y una menor resistencia a Ex (6.2 por ciento; 9/146), Cf (2,7por ciento; 4/146), N (2,0 por ciento; 3/146) y C (2,5por ciento; 4/146). Se encontró un porcentaje elevado de multirresistencia (65,0 por ciento; 95/146) y dentro de ellos, los más notorios fueron: NaNfTTr (42,1 por ciento), NaNfTr (26,3 por ciento) y NaNfT (10,5 por ciento). No se observó relación significativa (P>0,05) entre los patrones de resistencia y multirresistencia encontrados con el origen de las diferentes cepas de Salmonella. Estos resultados evidencian el surgimiento de cepas de Salmonellas resistentes a las quinolonas y la necesidad de programas de vigilancia de resistencia antimicrobiana.

The aim of this study was to determine the resistance and multi-resistance patterns of strains of Salmonella spp. isolated in a poultry processing plant in Zulia State, to quinolones and fluoroquinolones (Nalidixic acid=Na, ciprofloxacin=Cf, and enrofloxacin=Ex), as well as other antimicrobial drugs: tetracycline (T), oxitetracycline (O), neomycin (N), nitrofurantoine (Nf), trimetropim (Tr) and chloranfenicol (C). A total of 146 Salmonella isolates were obtained from different sources: 34 strains from pools of Intestines (duodenal and colon) and internal organs (liver and spleen); 87 strains of carcass samples collected in four different phases: carcasses after defeathering, evisceration, chilling, and final packed products; 8 strains from edible by-products (neck, liver, gizzard and legs) and 19 strains from environmental samples (water, ice, and equipment surfaces). The detection analyses were performed using conventional microbiological techniques, biochemical tests, serological and agar diffusion methods for antimicrobial susceptibility. The results showed a high resistance to Na (73.3%; 107/146), Nf (60.2%; 88/147), T (56.2%; 82/146), O (54.8%; 80/146), Tr (54.1%; 79/146) and low resistance to Ex (6.2%; 9/146), Cf (2.7%; 4/146), N (2.0%; 3/146) and C (2.7%; 4/146). There was observed a high percentage of multi-resistant strains (65.0%; 95/146) and within of them, the most common patterns were: NaNfTTr (42.1%), NaNfTr (26.3%) and NaNfT (10.5%). No significant relationship was observed (P>0.05) between resistance and multi-resistance patterns with the source of the Salmonella strains. These results are evidence of the emergence of resistant Salmonella strains to fluoroquinolones and the necessity of programs for antimicrobial resistance surveillance.

Estudio bioquímico y quirúrgico de pacientes con diversas patologías orales: Antofagasta, Chile / Biochemical and surgical study of patients with diverse oral pathologies. Antofagasta, Chile

A study of 24 cases with diverse oral pathologies appears at Medicine and Odontology Faculty of the University of Antofagasta between years 2001 and 2004, concurred to the Clinic of the Department of Odontology, between which were made measuements of the levels in protein saliva, catalasa and deshidrogenase. For the comparison aims one included 26 healthy people. It was observed high protein levels, like also greater enzymatic activity (catalasa and LDH), proportional to the type of diagnosed periodontal diseases in the patients, specially in the cases of periodontitis, oral cancer, peripheral granuloma and fissured epulis. The totality of the cases responded to the installed treatments, standing out the use of conventional screws of osteosynthesis, to fix the prothesis or canals to surgery of fissured epulis, or deepenings of lobbies, improving well-known the times of recovery, diminishing the hemorrhagic and increasing the comfort of the patient.

Se presenta un estudio de 24 casos con diversas patologías orales que concurrieron a la clínica del Departamento de Odontología de la Universidad de Antofagasta entre los años 2001 y 2004, entre los cuales se realizaron mediciones de los niveles en saliva de proteínas, catalasa y deshidrogenasa. Para los fines de comparación se incluyó 26 personas sanas. Se observó altos niveles de proteínas, como también mayor actividad enzimática (catalasa y LDH), proporcional al tipo de enfermedades periodontales diagnosticadas en los pacientes, especialmente en los casos de periodontitis, cáncer oral, granuloma perférico y epulis fisurado. La totalidad de los casos respondió a los tratamientos instalados, destacándose la utilización de tornillos convencionales de osteosíntesis, para fijar las prótesis o canaletas en cirugía de épulis fisurados, o en profundizaciones de vestíbulos, mejorando notoriamente los tiempos de recuperación, disminuyendo el sangramiento y aumentando el confort del paciente.

Diagnóstico de carência energética em bovinos por testes de metabolismo ruminal / Diagnosis of energy deficiency in cattle by ruminal metabolism tests

Avaliou-se o metabolismo ruminal de bovinos submetidos ou não a dietas carentes em energia, por meio de provas bioquimicas e funcionais no fluido ruminal e urinário com finalidade diagnóstica. Para tal, foram utilizados 10 garrotes mestiços providos de cânula ruminal que foram divididos em dois grupos, ou seja: controle (C; n=4) dieta balanceada para ganho diário de 900 g e carência pronunciada de energia (CP; n=6) recebendo 30% a menos do nível de mantença em energia. Após os bovinos serem alimentados por 140 d foram coletadas amostras de fluido ruminal e urina antes da alimentação e nas 1ª, 3ª, 6ª e 9ª h seguintes. A carência energética provocou diminuição significativa nos teores ruminais de AGVs totais, ácidos propiônico e butírico, amônio, elevando-se o tempo da prova de redução do azul de metileno (RAM) e menor produção de gases no teste de fermentação de glicose (FG); o índice de excreção urinária de alantoína (IEVA) também foi menor. A carência provocou aumento na porcentagem molar de ácido acético. Não se verificou efeito dos tratamentos sobre o pH ruminal. Existiram correlações positivas de grande íntensidade entre FG e AGV s e amônia, e de média intensidade entre FG e amônia e lEVA, assim como de correlação negativa, de média íntensidade, entre RAM e AGV s, amônia, FG e lEVA. Com exceção do pH todas as análises estudadas detectaram alterações no metabolismo ruminal provocada pela carência energética. Porém, considerando-se a praticidade dos testes, recomenda-se a prova do RAM, seguida pela FG para um diagnóstico rápido e sensível deste quadro carencial.

Ten yearling crossbred rumen-cannulated steers were randomly divided in two equal groups for studying some ruminal metabolism tests in caule fed adequate or deficient diets on energy. The control group (C) was fed a diet to gain 900 g/BW / d, while to the very deficient group (VD) was given a diet with 30 % less than the maintenance level of dietary energy. On the 140th d ruminal fluid and urine samples were coliected at the basal and in the 1st, 3rd, 6th and 9th h after the morning feeding. The energy deficiency caused significant decrease in the ruminal levels of total volatile fatty acids (VFA), propionic and butyric acids, and ammonium, an increase in time of methilene blue reduction test (MBRT) and decrease in the gas production in the glucose fermentation test (GFT); the urinary aliantoin excretion rate (UAER) was also lower. The deficiency caused an increased in the molar proportion of acetic acid. There was no diet effect on the ruminal fluid pH. There were high positive correlation between GFT and VFAs and ammonium, medium positive correlation between MBRT and VFAs, ammonium, GFT and UAER. All studied variables were able to detect changes in the ruminal metabolism in caule fed energy deficient diet, but the rumen fluid pH. Nevertheless, as far as the feasibility is concerned the MBRT, foliowed by the GFT should be adopted to allow a rapid and sensible diagnosis of dietary energy deficiency.